Plásmido Doble Nickase (h) PHF8: sc-407306-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PHF8 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PHF8 (h) y el plásmido de doble nickasa PHF8 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PHF8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PHF8 | sc-407306-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PHF8 | sc-407306-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF8 codifica una desmetilasa de lisina de histonas que contiene un dominio JmjC, la cual elimina preferentemente marcas represivas como H3K9me2/1 y también puede actuar sobre estados de metilación de H4K20, vinculando la remodelación de la cromatina con el control transcripcional. Mediante el reconocimiento de la metilación de H3K4 a través de su dedo PHD, PHF8 es reclutada a promotores activos, donde modula programas de expresión génica dependientes de la ARN polimerasa II. PHF8 participa en la regulación epigenética de la progresión del ciclo celular, la diferenciación neuronal y la dinámica de la cromatina asociada al daño del ADN. La desregulación o mutación de PHF8 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con redes transcripcionales relevantes en cáncer, lo que la convierte en una diana útil para estudiar la regulación génica dependiente de la cromatina.
PHF8 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PHF8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PHF8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PHF8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PHF8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.