PHF3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406857

Descripción general

PHF3 (proteína con dedo PHD 3) es un regulador transcripcional nuclear que se asocia con la ARN polimerasa II y contribuye al control de la elongación de la transcripción y del procesamiento co-transcripcional del ARN. A través de sus dominios de dedo PHD y de sus interacciones con la maquinaria de elongación, PHF3 influye en programas de expresión génica vinculados al mantenimiento del estado celular y a la transcripción en respuesta a estímulos. La alteración de la actividad de PHF3 se ha relacionado con cambios en la fidelidad transcripcional y con redes de control del crecimiento desreguladas, lo que la hace relevante para estudiar mecanismos que acoplan factores asociados a la cromatina con la síntesis de ARN. Por ello, PHF3 es de interés en áreas de investigación que abarcan la regulación génica, la diferenciación y la reprogramación transcripcional asociada a enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PHF3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PHF3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PHF3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PHF3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PHF3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PHF3 para la investigación de la señalización de PHF3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PHF3 críticos para la función de PHF3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PHF3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PHF3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PHF3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PHF3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PHF3 (h) y el plásmido HDR PHF3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PHF3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PHF3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.