PHC3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406576

Descripción general

PHC3 (homólogo 3 de polyhomeotic) es un componente central del complejo represor Polycomb 1 (PRC1) que contribuye a la compactación de la cromatina y al silenciamiento transcripcional estable de genes del desarrollo y de identidad celular. Mediante la regulación epigenética dependiente de Polycomb, PHC3 participa en el mantenimiento de los programas de linaje y en la regulación de la proliferación al moldear estados represivos de cromatina vinculados a la ubiquitinación de histonas. La actividad de Polycomb alterada y la represión desregulada asociada a PRC1 se implican con frecuencia en programas transcripcionales oncogénicos y en una diferenciación aberrante, lo que hace que PHC3 sea relevante para estudios de biología tumoral y control epigenético. La función de PHC3 también se utiliza como marcador para comprender cómo los reguladores de la cromatina coordinan redes génicas durante el desarrollo y las respuestas al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PHC3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PHC3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PHC3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PHC3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PHC3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PHC3 para la investigación de la señalización de PHC3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PHC3 críticos para la función de PHC3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PHC3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PHC3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PHC3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PHC3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PHC3 (h) y el plásmido HDR PHC3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PHC3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PHC3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.