PGD synthase Lentiviral Activation Particles (h): sc-405437-LAC

Das humane HPGDS-Gen kodiert die hämatopoetische Prostaglandin-D-Synthase (PGD-Synthase), ein glutathionabhängiges Enzym, das im Netzwerk der Arachidonsäure- und Eicosanoid-Biosynthese Prostaglandin H2 in Prostaglandin D2 umwandelt. PGD2 und seine nachgeschalteten Metaboliten regulieren die Chemotaxis von Leukozyten, die Zytokinsignalübertragung, den Gefäßtonus sowie den Klassenwechsel von Lipidmediatoren und verknüpfen damit die HPGDS-Aktivität mit Immun- und Entzündungsprozessen. Die Expression von HPGDS ist besonders ausgeprägt in Mastzellen und anderen hämatopoetischen Zelllinien und wird häufig im Kontext allergischer Entzündungen, Asthma und allgemeiner Mechanismen entzündlicher Erkrankungen untersucht. Da die PGD2-Signalisierung DP1/DP2-Rezeptorwege aktiviert und mit oxidativem Stress sowie dem Gleichgewicht zwischen Leukotrienen und Prostaglandinen verflochten ist, dient HPGDS als nützlicher Knotenpunkt zur Analyse lipidmediatorgetriebener Transkriptionsprogramme.

PGD synthase Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente HPGDS-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PGD synthase Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der HPGDS-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PGD synthase-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen HPGDS-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.