Perilipin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401305

Descripción general

PLIN1 codifica perilipina-1, una fosfoproteína asociada a las gotículas lipídicas que regula el almacenamiento de triglicéridos y la lipólisis en los adipocitos al controlar el acceso de las lipasas a la superficie de la gotícula. La perilipina integra eventos de fosforilación dependientes de cAMP/PKA con la movilización de lípidos en el tejido adiposo, coordinando interacciones con cofactores como ABHD5/CGI-58 y con enzimas como ATGL y HSL. A través de su papel en la biogénesis y el recambio de las gotículas lipídicas, PLIN1 influye en la homeostasis energética celular, el flujo de ácidos grasos y la señalización metabólica vinculada a adipocinas. Se han asociado alteraciones genéticas y funcionales en PLIN1 con disfunción del tejido adiposo en humanos, incluidos fenotipos de lipodistrofia y desregulación metabólica, lo que lo convierte en una diana útil para estudiar el manejo de lípidos en modelos celulares relevantes.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Perilipin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PLIN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PLIN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PLIN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Perilipin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PLIN1 para la investigación de la señalización de Perilipin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PLIN1 críticos para la función de Perilipin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PLIN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Perilipin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Perilipin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PLIN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Perilipin (h) y el plásmido HDR Perilipin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PLIN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PLIN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.