Plásmido Doble Nickase (h) PELP1: sc-405376-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PELP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PELP1 (h) y el plásmido de doble nickasa PELP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PELP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PELP1 Anticuerpo (E-1): sc-390599
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PELP1 | sc-405376-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PELP1 | sc-405376-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PELP1 (proteína 1 rica en prolina, ácido glutámico y leucina) es un corregulador de receptores nucleares que integra la señalización del receptor de estrógeno y de otros receptores esteroideos con la remodelación de la cromatina y el control transcripcional. Actúa como andamiaje para complejos que acoplan la expresión génica impulsada por receptores a la progresión del ciclo celular, la biogénesis ribosomal y las vías de respuesta al daño del ADN, y puede desplazarse entre los compartimentos nuclear y citoplasmático para modular la señalización de quinasas. A través de estas interacciones, PELP1 contribuye a programas de transcripción sensibles a hormonas y a redes reguladoras más amplias que influyen en la proliferación, la supervivencia y la estabilidad del genoma. La expresión o localización desregulada de PELP1 se ha asociado con alteraciones en la señalización oncogénica y con la progresión en múltiples contextos de cáncer, lo que respalda su uso como diana mecanística en estudios centrados en vías.
PELP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PELP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PELP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PELP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PELP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.