Pdcd-1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-422150-LAC

Das murine Gen *Pdcd1* kodiert Pdcd-1 (PD-1), einen inhibitorischen Immun-Checkpoint-Rezeptor, der auf aktivierten T‑Zellen, B‑Zellen und myeloiden Zellpopulationen induziert wird und die Antigenrezeptor-Signalübertragung dämpft, um die periphere Toleranz aufrechtzuerhalten. Nach Bindung durch PD‑L1 oder PD‑L2 rekrutiert PD‑1 die Phosphatase SHP2, um die proximale TCR/CD28-Signalgebung sowie nachgeschaltete PI3K–AKT–mTOR- und RAS–MAPK-Signalwege abzuschwächen; dadurch werden Proliferation, Zytokinproduktion und metabolische Fitness reduziert. Die *Pdcd1*-Expression ist ein Kennzeichen der T‑Zell-Erschöpfung bei chronischer Antigenexposition und prägt die Dynamik des Keimzentrums, wodurch sie die Immunregulation bei Infektionen, Entzündungen und tumorassoziierter Immunflucht beeinflusst. In Mausmodellen wird *Pdcd1* häufig untersucht, um die Checkpoint-Biologie, die Differenzierung von Immunzellen und Mechanismen funktioneller Hyporesponsivität aufzuklären.

Pdcd-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Pdcd1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Pdcd-1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Pdcd1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Pdcd-1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Pdcd1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.