Plásmido Doble Nickase (h) PARP-14: sc-402812-NIC

PARP14 (PARP-14/ARTD8) es una mono-ADP-ribosiltransferasa que regula la ADP-ribosilación de proteínas para modular programas transcripcionales, la transducción de señales y procesos asociados a la cromatina. Interactúa con vías impulsadas por citocinas, incluida la señalización dependiente de STAT6, y puede influir en la expresión génica inflamatoria, las respuestas al estrés y la regulación metabólica mediante sus interacciones con factores de transcripción y proteínas de unión a ARN. La actividad de PARP-14 contribuye a la diferenciación y polarización de células inmunitarias, moldeando respuestas en contextos de inflamación alérgica y defensa del huésped. La desregulación de la expresión o la función de PARP14 se ha relacionado con redes alteradas de señalización inmunitaria y se ha investigado en biología del cáncer por sus posibles funciones en señales de supervivencia y adaptación transcripcional.

PARP-14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PARP14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PARP14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PARP14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PARP14 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.