Pannexin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405925

Descripción general

PANX2 codifica la pannexina-2, una proteína formadora de canales en la membrana plasmática que media la liberación de ATP y otras moléculas pequeñas para coordinar la señalización autocrina y paracrina. La pannexina-2 contribuye a redes de señalización purinérgica que influyen en la dinámica del calcio intracelular, en respuestas asociadas al inflamasoma y en la comunicación neurona–glía, vinculando la actividad del canal con el estrés celular y la modulación de la inmunidad innata. Su expresión está enriquecida en el sistema nervioso y se ha investigado en contextos de neuroinflamación, lesión excitotóxica y comportamiento tumoral alterado, donde la señalización por nucleótidos extracelulares puede reconfigurar la proliferación y las señales del microambiente. Estas propiedades hacen de PANX2 un objetivo útil para dilucidar cómo los canales de membrana integran el estrés metabólico con vías inflamatorias y sinápticas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Pannexin-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PANX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PANX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PANX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Pannexin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PANX2 para la investigación de la señalización de Pannexin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PANX2 críticos para la función de Pannexin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PANX2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Pannexin-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PANX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Pannexin-2 (h) y el plásmido HDR Pannexin-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PANX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PANX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.