palladin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-428317-KO-2

Übersicht

Das Mausgen **Palld** kodiert Palladin, ein aktinassoziiertes Scaffold-Protein, das die Organisation des Zytoskeletts koordiniert, indem es an Aktin-Regulatoren bindet und Komponenten in Stressfasern, fokalen Adhäsionen und anderen Adhäsionskomplexen vernetzt. Palladin unterstützt die Kontrolle der Zellform, die Reifung von Adhäsionen und die gerichtete Migration und integriert dabei Signale von Rho-Familien-GTPasen sowie Signalwegen, die die Aktomyosin-Kontraktilität und Interaktionen mit der extrazellulären Matrix steuern. Eine veränderte Expression oder Lokalisation von Palladin wurde in krebsrelevanten Kontexten mit abnormalem Gewebeumbau und invasiven Phänotypen in Verbindung gebracht, was **Palld** zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Zytoskelett-Dysregulation macht. Im Mausmodell wird die Manipulation von **Palld** häufig eingesetzt, um Mechanismen von Motilität, Mechanotransduktion und adhäsionsabhängiger Signalübertragung in Entwicklungs- und Krankheitsmodellen zu analysieren.

Das palladin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Palld-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Palld-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Palld nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die palladin-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Palld-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der palladin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Palld-Exone abzielen, die für die palladin-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Palld-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom palladin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom palladin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Palld-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das palladin HDR-Plasmid (m) und palladin HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Palld-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Palld-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.