Plasmide Double Nickase (h) PAF-R: sc-402569-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PAF-R correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PAF-R Double Nickase (h) et le plasmide PAF-R Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PTAFR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PAF-R | sc-402569-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **PTAFR** code le récepteur du facteur d’activation plaquettaire (**PAF‑R**), un récepteur couplé aux protéines G qui se lie au facteur d’activation plaquettaire pour déclencher l’activation de la phospholipase C, la mobilisation du Ca²⁺ intracellulaire, ainsi que les voies de signalisation MAPK et NF‑κB en aval. L’activité de PAF‑R module la chimiotaxie des leucocytes, l’activation endothéliale, la perméabilité vasculaire et la production de cytokines, reliant la détection de médiateurs lipidiques aux programmes de l’immunité innée et de l’inflammation. Une dérégulation de la signalisation PTAFR/PAF‑R a été associée à des réponses inflammatoires et allergiques, à des voies liées à l’asthme et à l’inflammation associée aux tumeurs, et elle est étudiée dans des contextes tels que la biologie du sepsis, l’athérosclérose, ainsi que des modèles d’inflammation cutanée et des voies respiratoires.
PAF-R Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PTAFR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PTAFR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PTAFR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PTAFR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.