Plásmido Doble Nickase (h) PABPC4: sc-411206-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PABPC4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PABPC4 (h) y el plásmido de doble nickasa PABPC4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PABPC4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PABPC4 | sc-411206-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PABPC4 | sc-411206-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PABPC4 (proteína citoplasmática de unión a poli(A) 4) es una proteína de unión a ARN que se asocia a las colas poli(A) de los ARNm maduros para regular la estabilidad del transcrito, el inicio de la traducción y el recambio (degradación) del ARNm en el citoplasma. Al participar en complejos centrales de ribonucleoproteínas mensajeras (mRNP) e interactuar con factores de traducción, PABPC4 ayuda a coordinar programas de expresión génica posranscripcional que moldean la activación celular y las respuestas al estrés. PABPC4 se ha estudiado en el contexto de la biología hematopoyética e inmunitaria, donde las alteraciones en el procesamiento del ARNm y en el control de la traducción pueden contribuir a una proliferación desregulada y a la señalización inflamatoria. La perturbación de la dinámica de las mRNP dependiente de PABPC4 también es relevante para investigar mecanismos de enfermedad vinculados a un metabolismo del ARN aberrante.
PABPC4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PABPC4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PABPC4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PABPC4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PABPC4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.