p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402401

概述

DDX5 编码 p68 RNA 解旋酶，属于 DEAD-box 家族的 ATP 依赖性 RNA 解旋酶，能够重塑 RNA 及核糖核蛋白复合物，从而调控 pre-mRNA 剪接、核糖体生物发生和 microRNA 加工。p68 还可通过与对信号刺激有反应的转录因子相互作用，作为转录共调节因子发挥功能，将 RNA 代谢与调控细胞周期进程和应激反应的基因表达程序连接起来。通过这些作用，DDX5 有助于维持基因组完整性，并协调 DNA 损伤应答与 RNA 加工过程。DDX5 的表达或功能失调与多种肿瘤背景中的致癌性转录网络及改变的 RNA 剪接图谱相关，因此是研究 RNA 驱动疾病表型机制的一个有价值节点。

p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中DDX5基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对DDX5基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏DDX5开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使p68 RNA Helicase蛋白表达失活。

该CRISPR敲除系统能够高效构建DDX5缺失的细胞模型，用于p68 RNA Helicase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

主要特点

• 针对对 p68 RNA Helicase 功能至关重要的 DDX5 外显子的 sgRNA
  通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
  GFP 报告基因用于识别转染细胞
  针对多个 DDX5 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
  兼容转染递送

设计变体

CRISPRs +/- HDR

• 由 p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 p68 RNA Helicase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 DDX5 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
  由 p68 RNA Helicase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 p68 RNA Helicase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由DDX5同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定DDX5靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。