Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
p53R2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402192
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- p53R2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico p53R2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: p53R2 Anticuerpo (H-3): sc-137173
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
p53R2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402192 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RRM2B codifica p53R2, una subunidad pequeña de la ribonucleótido reductasa inducible por p53 que suministra desoxirribonucleótidos para la síntesis y la reparación del ADN, especialmente en condiciones de estrés. p53R2 favorece el mantenimiento del ADN mitocondrial y contribuye al equilibrio redox y a la supervivencia celular durante el estrés replicativo al sostener los reservorios de dNTP. Desde el punto de vista funcional, conecta la respuesta al daño del ADN, la señalización de p53 y el metabolismo de nucleótidos, influyendo en la estabilidad del genoma y el control de los puntos de control. La desregulación de RRM2B se ha asociado con fenotipos de depleción de ADN mitocondrial y con la adaptación al estrés relacionada con el cáncer, lo que la hace relevante para estudios de mantenimiento genómico y reprogramación metabólica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO p53R2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RRM2B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RRM2B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RRM2B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína p53R2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RRM2B para la investigación de la señalización de p53R2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RRM2B críticos para la función de p53R2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RRM2B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido p53R2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido p53R2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RRM2B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR p53R2 (h) y el plásmido HDR p53R2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RRM2B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RRM2B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.