Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p107 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422614
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p107 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p107, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p107 Anticorpo (SD9): sc-250
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p107 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422614 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Rbl1** de camundongo codifica a proteína da família do retinoblastoma **p107**, um regulador do ciclo celular que restringe a progressão **G1/S** ao se ligar a fatores de transcrição **E2F** e coordenar a sinalização de quinases dependentes de ciclina. A p107 integra sinais mitogênicos ao controle transcricional da replicação do DNA e da entrada na fase S, além de contribuir para a imposição de checkpoints e para programas de diferenciação celular. Como parte da via de RB, a função da p107 se cruza com as redes de **pRB/p130** para modular a repressão associada à cromatina e decisões de proliferação. A desregulação do controle pela família RB e da atividade de E2F é amplamente relevante para modelos de transformação oncogênica e para estudos de proliferação aberrante e comprometimento de linhagem em tecidos de mamíferos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p107 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rbl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rbl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rbl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p107.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rbl1 para a investigação da sinalização de p107, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rbl1 críticos para a função p107
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rbl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p107 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo p107 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rbl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p107 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR p107 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rbl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rbl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.