P/Q-type Ca⁺⁺ CP α1A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419400

개요

Cacna1a는 P/Q형 전압개폐성 칼슘 채널(CaV2.1)의 기공을 형성하는 α1A 소단위를 암호화하며, 이는 신경세포에서 활동 의존적 Ca2+ 유입이 일어나는 주요 경로입니다. CaV2.1은 막 탈분극을 시냅스 소포의 외배출(exocytosis)과 연결하여, Ca2+ 의존성 신호전달 경로를 통해 신경전달물질 방출 확률, 단기 가소성, 그리고 회로 흥분성을 조절합니다. 채널의 기능은 시냅스 전말단 활성부위(active zone) 단백질 및 소포의 도킹과 융합을 조절하는 하위 Ca2+ 센서들과 통합적으로 연계되어 있습니다. CACNA1A/CaV2.1의 유전적·기능적 이상은 시냅스 전달 변화와 신경망 불안정성을 동반하는 신경학적 표현형과 연관되어 있어, 신경생리 기전 연구의 핵심 표적으로 여겨집니다.

P/Q-type Ca++ CP α1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cacna1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cacna1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cacna1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P/Q-type Ca++ CP α1A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P/Q-type Ca++ CP α1A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cacna1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P/Q-type Ca++ CP α1A 기능에 중요한 Cacna1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cacna1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P/Q-type Ca++ CP α1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 P/Q-type Ca++ CP α1A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cacna1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P/Q-type Ca++ CP α1A HDR 플라스미드 (m) 및 P/Q-type Ca++ CP α1A HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cacna1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cacna1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.