Plásmido Doble Nickase (h) OTUD2: sc-406672-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)OTUD2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa OTUD2 (h) y el plásmido de doble nickasa OTUD2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a YOD1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) OTUD2 | sc-406672-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano YOD1 codifica la enzima desubiquitinante OTUD2, una proteasa de cisteína con dominio OTU que edita las señales de ubiquitina para regular la estabilidad de las proteínas y los resultados de la señalización. OTUD2 participa en el control dependiente de ubiquitina de la proteostasis y de las respuestas al estrés, interactuando con vías que gobiernan la degradación asociada al retículo endoplásmico, la señalización inflamatoria y la remodelación de ubiquitina vinculada al daño en el ADN. Al modular la cinética y la especificidad de la eliminación de cadenas de ubiquitina, OTUD2 puede influir en programas transcripcionales, la progresión del ciclo celular y los umbrales de apoptosis. La desregulación de las vías de desubiquitinación en las que participa OTUD2 se ha asociado con alteraciones en la señalización inmunitaria y fenotipos oncogénicos, lo que impulsa estudios mecanísticos en biología tumoral e inflamación.
OTUD2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus YOD1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de YOD1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de YOD1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con YOD1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.