ORNT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422074
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ORNT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ORNT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ORNT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422074 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Slc25a15 codifica el transportador mitocondrial de ornitina ORNT1, un miembro de la familia de transportadores SLC25 que media el intercambio de ornitina a través de la membrana interna mitocondrial. En el ratón, ORNT1 sostiene el ciclo de la urea al suministrar ornitina mitocondrial para la carbamoilación y al facilitar el flujo citrulina/ornitina acoplado a la eliminación de nitrógeno y al catabolismo de aminoácidos. Esta actividad de transporte vincula el metabolismo mitocondrial con el manejo citosólico del nitrógeno, influyendo en redes metabólicas relacionadas con la arginina y las poliaminas. La desregulación del transporte de ornitina y del flujo del ciclo de la urea se asocia con fenotipos metabólicos relacionados con la hiperornitinemia y puede afectar las respuestas celulares al estrés por nitrógeno.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ORNT1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc25a15 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc25a15 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc25a15 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ORNT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc25a15 para la investigación de la señalización de ORNT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Slc25a15 críticos para la función de ORNT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc25a15 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ORNT1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido ORNT1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc25a15. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ORNT1 (m) y el plásmido HDR ORNT1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc25a15 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc25a15 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.