Plásmido Doble Nickase (m2) Olfr45: sc-422035-NIC-2
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m2)Olfr45 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Olfr45 (m2) y el plásmido de doble nickasa Olfr45 (m22) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Olfr45. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m2) Olfr45 | sc-422035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Olfr45 del ratón codifica un receptor olfativo de la superfamilia de receptores acoplados a proteínas G (GPCR) que participa en el reconocimiento de odorantes y en la transducción de señales en el epitelio sensorial olfativo. Tras la unión del ligando, se espera que OLFR45 se acople a proteínas G heterotriméricas, modulando la actividad de la adenilato ciclasa, la producción de AMPc y la activación posterior de canales iónicos para impulsar la despolarización neuronal y la entrada de señales a los circuitos olfativos. La expresión o señalización alteradas de los receptores olfativos son relevantes para estudios de disfunción sensorial y de mecanismos regulatorios más amplios de los GPCR, incluidos el tráfico del receptor, la desensibilización y el control transcripcional durante la diferenciación neuronal. La edición génica de Olfr45 respalda experimentos de genómica funcional, como el mapeo de la especificidad odorante–receptor, el análisis de nodos de señalización de GPCR en neuronas sensoriales y la generación de modelos murinos para investigar fenotipos vinculados a la olfacción y la homeostasis neuroepitelial.
Olfr45 El plásmido de doble nicasa (m2) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Olfr45 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Olfr45. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Olfr45. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Olfr45 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.