OGFRL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407392

Descripción general

OGFRL1 (receptor del factor de crecimiento opioide tipo 1) codifica una proteína tipo receptor relacionada con la familia del receptor del factor de crecimiento opioide y se cree que participa en redes reguladoras que conectan señales extracelulares con el control intracelular del crecimiento y la supervivencia celular. Aunque el mecanismo molecular preciso sigue sin definirse por completo, OGFRL1 se ha implicado en vías que regulan la proliferación, la diferenciación y la homeostasis tisular, procesos que con frecuencia se remodelan durante la transformación oncogénica y la adaptación al microambiente. Se han descrito patrones alterados de expresión de OGFRL1 en estudios transcriptómicos en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su uso como modulador candidato en transiciones del estado celular. En consecuencia, OGFRL1 resulta de interés para desentrañar la comunicación cruzada entre vías de señalización que influye en el control del crecimiento, las respuestas al estrés y la plasticidad celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OGFRL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OGFRL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OGFRL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OGFRL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OGFRL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OGFRL1 para la investigación de la señalización de OGFRL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OGFRL1 críticos para la función de OGFRL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OGFRL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OGFRL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OGFRL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OGFRL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OGFRL1 (h) y el plásmido HDR OGFRL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OGFRL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OGFRL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.