Plásmido Doble Nickase (h) ODCp: sc-410634-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ODCp consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ODCp (h) y el plásmido de doble nickasa ODCp (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a AZIN2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ODCp | sc-410634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ODCp | sc-410634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El AZIN2 humano codifica el parálogo de la ornitina descarboxilasa (ODCp), un regulador de la vía de las poliaminas que modula los niveles celulares de putrescina, espermidina y espermina al interactuar con el control dependiente de antizima sobre la actividad y el recambio de la descarboxilasa. Mediante esta regulación, AZIN2 contribuye a la homeostasis de las poliaminas, influyendo en procesos fundamentales como la traducción, la progresión del ciclo celular, el tráfico vesicular y la diferenciación. La desregulación del metabolismo de las poliaminas se asocia con frecuencia a cambios en la proliferación y en las respuestas al estrés, lo que hace que AZIN2/ODCp sea relevante para estudiar la reprogramación metabólica y el control del crecimiento en distintos estados celulares asociados a enfermedad. La expresión de AZIN2 también se ha relacionado con fenotipos secretores especializados en determinados tejidos, lo que respalda la investigación de la regulación de la secreción y la maduración celular dependientes de poliaminas.
ODCp El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus AZIN2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de AZIN2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de AZIN2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con AZIN2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.