Partículas Lentivirales de Activación (h) OB-cadherin: sc-401051-LAC

CDH11 codifica la OB-cadherina, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio que favorece interacciones homofílicas y la formación del complejo cadherina–catenina en las uniones adherentes. Mediante su acoplamiento a la remodelación de actina y a la señalización de las uniones, la OB-cadherina influye en la polaridad celular, la migración y la morfogénesis tisular, y puede modular vías asociadas a la transición epitelio–mesénquima y a la organización del estroma. En tejidos humanos, CDH11 se estudia de forma destacada en linajes mesenquimales como osteoblastos y fibroblastos, donde contribuye a la remodelación de la matriz extracelular y al acoplamiento mecánico entre células. La expresión desregulada de CDH11 se ha asociado con remodelación patológica de tejidos y comportamiento invasivo en varios contextos de enfermedad, lo que impulsa su uso como marcador y como nodo funcional en la investigación relacionada con adhesión y fibrosis.

Las partículas de activación lentiviral OB-cadherin (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CDH11 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral OB-cadherin (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CDH11, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de OB-cadherin. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CDH11 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.