NUCKS Plasmide Double Nickase (h): sc-413018-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- NUCKS Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il NUCKS Double Nickase Plasmid (h) e il NUCKS Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NUCKS1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
NUCKS Plasmide Double Nickase (h) | sc-413018-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NUCKS Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413018-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NUCKS1 codifica NUCKS, una proteina nucleare associata alla cromatina coinvolta nel coordinamento tra la regolazione trascrizionale e la replicazione e riparazione del DNA. È stato riportato che NUCKS venga fosforilata in modo dipendente dal ciclo cellulare e che partecipi al rimodellamento della cromatina e ai processi di mantenimento del genoma che si interfacciano con la segnalazione della risposta al danno del DNA. Un’espressione alterata di NUCKS1 è stata associata a fenotipi proliferativi ed è stata osservata in molteplici contesti oncologici, a supporto della sua rilevanza nello studio del controllo del ciclo cellulare, delle risposte allo stress e delle reti regolatorie associate ai tumori. In quanto fattore nucleare con un ampio raggio d’azione regolatorio, NUCKS1 è frequentemente studiato per il suo contributo a programmi trascrizionali che modellano crescita, sopravvivenza e stabilità genomica.
NUCKS Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NUCKS1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NUCKS1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NUCKS1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NUCKS1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.