NSP3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407380

개요

SH2D3C는 NSP3를 암호화하며, NSP3는 SH2 및 SH3 도메인을 포함하는 세포질성 어댑터 단백질로서 티로신 인산화된 수용체를 하위 신호전달 복합체에 연결하는 데 도움을 줍니다. NSP3는 세포골격 재구성, 인테그린 의존적 부착, 수용체 매개 신호전달을 조절하는 경로에 관여하여 세포 이동과 면역 관련 세포 행동에 영향을 미칩니다. 키나아제 및 스캐폴드 단백질과의 상호작용을 통해 MAPK를 비롯한 기타 인산화 티로신 기반 네트워크를 조절할 수 있으며, 이는 활성화 역치와 세포 운동성 프로그램을 형성합니다. 어댑터 신호의 이상 조절과 부착/이동 표현형의 변화는 염증 생물학 및 암 관련 과정에서 흔히 관여하는 것으로 알려져 있어, SH2D3C는 신호전달 회로의 기전 연구에 유용한 표적입니다.

NSP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SH2D3C 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SH2D3C 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SH2D3C의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NSP3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NSP3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SH2D3C 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NSP3 기능에 중요한 SH2D3C 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SH2D3C 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NSP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NSP3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SH2D3C 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NSP3 HDR 플라스미드 (h) 및 NSP3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SH2D3C 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SH2D3C 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.