Notch 3 렌티바이러스의 활성화 입자 (m): sc-421933-LAC
- Target species: mouse
- 200 µl of transduction-ready, high-titer CRISPR/dCas9 Lentiviral Activation Particles
- Notch 3 Lentiviral Activation Particles (m) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 세포에 대한lentiviral transduction을 통해 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- Notch 3 Lentiviral Activation Particles (m) 은 아래의 SAM Activation elements를 포함하고 있습니다: transactivation domain VP64과 융합된 deactivated Cas9 (dCas9) 뉴클리아제 (D10A and N863A),MS2-p65-HSF1융합 프로틴과 타깃특정 20 nt guide RNA. 또한 각각 blasticidin, hygromycin 과 puromycin resistance genes를 포함하고있습니다.
- SAM complex는 transduction후 transcriptional start site상류의 약 200-250 nt의 특정위치에 바인딩하여 고효율gene activation에 필요한 transcription factor을 증가시킵니다.
- Notch 3 렌티바이러스 활성화 플라스미드 (m) 및 Notch 3 렌티바이러스 활성화 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Notch3 프로모터의 서로 다른 조절 영역을 표적으로 합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 사용할 수 있습니다
- Transfection, gene activation효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 Notch 3 Antibody (A-6): sc-515825
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Notch 3 렌티바이러스의 활성화 입자 (m) | sc-421933-LAC | 200 µl | $455.00 |
Notch3는 세포 운명 결정, 분화, 조직 항상성을 조절하는 접촉 의존성(juxtacrine) 신호전달을 매개하는 단일 통과형 막관통 수용체인 Notch 3를 암호화한다. 리간드가 결합하면 단백질분해성 가공 과정을 통해 Notch 세포내 도메인(Notch intracellular domain)이 방출되고, 이는 RBPJ/CSL 복합체를 통해 전사 프로그램을 조절하며 증식과 계통(lineage) 결정에 관여하는 경로들과 통합된다. 마우스 시스템에서 Notch3 활성은 특히 혈관 평활근 생물학, 신경발달 과정, 면역세포 기능과 관련이 크며, 신호전달의 이상 조절은 맥락 의존적인 종양성 및 발달성 표현형을 연구하는 모델 축으로 널리 활용된다. Notch 신호는 용량과 타이밍에 크게 좌우되므로, 경로 간 크로스톡과 전사 네트워크 역학을 규명하기 위해서는 내인성 Notch3를 정밀하게 조절하는 것이 중요하다.
Notch 3 렌티바이러스 활성화 입자(m)는 완전한 시너지 활성화 매개체(SAM) 전사 활성화 시스템을 전달 준비가 된 고역가 렌티바이러스 입자에 포장함으로써 이러한 요구를 충족시키며, 더 광범위한 인간 세포 유형에서 효율적인 Notch3 발현 증가를 가능하게 합니다.
Notch 3 렌티바이러스 활성화 입자(m)는 렌티바이러스 전이를 통해 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템의 모든 기능적 구성 요소를 전달합니다. 이 시스템은 표적 세포로 공동 전달되는 세 가지 입자 제제로 구성됩니다: 하나는 촉매 활성이 없는 dCas9(D10A 및 N863A 돌연변이)을 VP64 전사 활성화 도메인과 결합시킨 형태로, 블라스티시딘 내성 유전자를 포함하며; 하나는 히그로마이신 저항성 유전자와 융합된 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며; 또 하나는 푸로마이신 저항성 유전자와 융합된 두 개의 MS2 RNA 아파타머에 표적 특이적 20 nt sgRNA가 융합된 것을 암호화합니다. 렌티바이러스 매개 전달 및 발현 카세트의 게놈 통합 후, SAM 구성 요소들은 안정적으로 발현되며 Notch3 전사 개시점 상류의 근위 프로모터 영역 내 표적 부위에 집합합니다. 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1은 협력하여 내인성 전사 기구를 모집하고 내인성 Notch 3 발현의 지속적인 상향 조절을 유도합니다. 뉴클레아제 비활성 dCas9을 사용함으로써 이중 가닥 DNA 절단이 발생하지 않으며, Notch3의 본래 게놈 위치와 조절 구조를 보존할 수 있습니다.
렌티바이러스 형식은 몇 가지 실질적인 이점을 제공합니다: 안정적인 게놈 통합은 세포 분열을 통한 유전적 활성화를 지원하며, 고역가 입자 제제는 자체 바이러스 생산의 필요성을 없애고, 1차 세포, 비분열 세포 및 형질 도입 저항성 세포 유형과의 호환성은 실험적 접근성을 확대합니다. 성공적인 전이는 푸로마이신, 하이그로마이신, 블라스티시딘을 이용한 삼중 항생제 선별을 통해 확인하고 증폭할 수 있습니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.