NOK Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433993

Descripción general

La quinasa 1 de serina/treonina/tirosina (Styk1), también conocida como NOK, codifica una proteína quinasa tipo receptor implicada en la regulación de la señalización sensible a factores de crecimiento y del comportamiento de las células epiteliales. En sistemas murinos, NOK se ha vinculado con la modulación de las respuestas de las vías MAPK/ERK y PI3K/AKT, que influyen en la proliferación, la supervivencia y los fenotipos de transformación celular. La actividad alterada de STYK1/NOK se ha asociado con contextos de señalización oncogénica, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de la biología tumoral y del reconfiguramiento de redes impulsado por quinasas. Estas características sitúan a Styk1 como un nodo útil para analizar la comunicación cruzada entre quinasas receptoras, los eventos de fosforilación aguas abajo y los programas de señalización adaptativos al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NOK (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Styk1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Styk1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Styk1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NOK.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Styk1 para la investigación de la señalización de NOK, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Styk1 críticos para la función de NOK
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Styk1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NOK CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NOK CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Styk1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NOK (m) y el plásmido HDR NOK (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Styk1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Styk1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.