Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Nodal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401439
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nodal O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Nodal, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nodal Anticorpo (G-10): sc-373910
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nodal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401439 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **NODAL** codifica Nodal, um morfógeno secretado da superfamília **TGF-β** que sinaliza principalmente por meio dos receptores de **Activina** e de **SMAD2/3** para regular a especificação do mesendoderma, o estabelecimento do eixo esquerda–direita e a manutenção de programas de pluripotência durante o desenvolvimento inicial. Em células humanas, Nodal integra-se a reguladores de retroalimentação como **LEFTY** e a interações (“crosstalk”) com as vias **WNT** e **FGF** para moldar decisões de linhagem, transições epitélio–mesênquima e redes transcricionais que controlam estados de células-tronco. Expressão aberrante de **NODAL** foi relatada em múltiplos contextos tumorais e é frequentemente estudada por sua associação com fenótipos invasivos, plasticidade celular e circuitos de sinalização ligados à resistência. Como um nó de via, Nodal é comumente investigado em biologia do desenvolvimento, biologia do câncer e modelos de diferenciação de células-tronco.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nodal (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NODAL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NODAL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NODAL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nodal.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NODAL para a investigação da sinalização de Nodal, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NODAL críticos para a função Nodal
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NODAL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Nodal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Nodal Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NODAL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Nodal Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Nodal (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NODAL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NODAL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.