NMUR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404637
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NMUR2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NMUR2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NMUR2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404637 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El receptor 2 de neuromedina U (NMUR2) es un receptor acoplado a proteína G que se expresa predominantemente en el sistema nervioso central y media la señalización del neuropéptido neuromedina U. La activación de NMUR2 implica principalmente vías dependientes de Gq/11 para elevar el calcio intracelular y modular MAPK y otras cascadas de segundos mensajeros que influyen en la excitabilidad neuronal y en las respuestas neuroendocrinas. A través de estas redes de señalización, NMUR2 contribuye a la regulación del balance energético, el apetito, la respuesta al estrés y conductas vinculadas al ritmo circadiano. La alteración de la señalización de NMUR2 se ha investigado en contextos de desregulación metabólica y fenotipos neuroconductuales, lo que respalda su utilidad como diana en estudios mecanísticos de la comunicación entre cerebro y metabolismo.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NMUR2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NMUR2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NMUR2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NMUR2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NMUR2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NMUR2 para la investigación de la señalización de NMUR2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NMUR2 críticos para la función de NMUR2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NMUR2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NMUR2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NMUR2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NMUR2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NMUR2 (h) y el plásmido HDR NMUR2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NMUR2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NMUR2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.