Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NMD3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406373
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NMD3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NMD3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NMD3 Anticuerpo (A-5): sc-515426
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NMD3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406373 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NMD3 codifica un factor esencial de biogénesis ribosomal que actúa como adaptador para la exportación de las subunidades ribosomales pre-60S desde el núcleo al citoplasma. Al coordinarse con la vía de exportación CRM1/XPO1 y con los eventos de remodelación durante la maduración tardía del 60S, NMD3 ayuda a garantizar el ensamblaje productivo de ribosomas con capacidad funcional para la traducción y el mantenimiento de la proteostasis. La alteración de la exportación ribosomal dependiente de NMD3 puede desencadenar respuestas de estrés nucleolar y modificar la progresión del ciclo celular mediante efectos posteriores sobre la traducción global. Dado que la biogénesis ribosomal está estrechamente ligada al control del crecimiento, la regulación aberrante de este proceso es relevante para el estudio de mecanismos de enfermedad asociados a la proliferación y al estrés, incluidas las ribosomopatías y la reprogramación translacional asociada al cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NMD3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NMD3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NMD3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NMD3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NMD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NMD3 para la investigación de la señalización de NMD3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NMD3 críticos para la función de NMD3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NMD3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NMD3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NMD3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NMD3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NMD3 (h) y el plásmido HDR NMD3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NMD3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NMD3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.