NMD3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406373

개요

NMD3는 핵에서 세포질로 pre-60S 리보솜 소단위체를 수출하는 데 필요한 필수 리보솜 생합성 인자를 암호화하며, 이 과정에서 어댑터로 기능한다. NMD3는 CRM1/XPO1 수출 경로 및 60S 성숙 후기 단계의 리모델링 사건들과 협력함으로써, 번역에 적합한 기능적 리보솜의 효율적인 조립과 단백질 항상성(proteostasis) 유지를 돕는다. NMD3 의존적 리보솜 수출이 교란되면 핵소체 스트레스 반응이 유발되고, 전반적 번역에 대한 하위 영향으로 인해 세포주기 진행이 변화할 수 있다. 리보솜 생합성은 성장 조절과 밀접하게 연결되어 있으므로, 이 과정의 비정상적 조절은 리보소모병(ribosomopathies) 및 암 관련 번역 재배선(translational rewiring)을 포함한 증식성 및 스트레스 연관 질환 기전 연구와 관련성이 높다.

NMD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NMD3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NMD3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NMD3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NMD3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NMD3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NMD3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NMD3 기능에 중요한 NMD3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NMD3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NMD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NMD3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NMD3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NMD3 HDR 플라스미드 (h) 및 NMD3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NMD3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NMD3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.