Plásmido Doble Nickase (m) NIF3L1 BP1: sc-425902-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)NIF3L1 BP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NIF3L1 BP1 (m) y el plásmido de doble nickasa NIF3L1 BP1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Thoc7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) NIF3L1 BP1 | sc-425902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) NIF3L1 BP1 | sc-425902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Thoc7 de ratón codifica un componente del complejo ribonucleoproteico THO/TREX, que facilita el procesamiento co‑transcripcional del ARNm y la exportación eficiente de transcritos maduros desde el núcleo. Al acoplar la elongación de la transcripción con el ensamblaje de los complejos mRNP, THOC7 ayuda a mantener el control de calidad del ARN y la estabilidad del genoma, e influye en programas celulares como la proliferación y la diferenciación. La alteración de factores asociados a TREX se ha relacionado con un metabolismo del ARN anómalo, conflictos entre transcripción y replicación, y respuestas al estrés que con frecuencia están implicadas en la biología del cáncer y en fenotipos del neurodesarrollo. Por ello, Thoc7 es una diana útil para analizar cómo la exportación de ARN y la homeostasis de los R‑loops moldean las redes de expresión génica en células de mamífero.
NIF3L1 BP1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Thoc7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Thoc7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Thoc7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Thoc7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.