Partículas Lentivirales de Activación (h) Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7: sc-416614-LAC

CHRNA7 codifica la subunidad α7 del receptor nicotínico de acetilcolina (nAChR), un canal iónico homopentamérico activado por ligando con alta permeabilidad al Ca²⁺, que conecta la señalización colinérgica con una despolarización rápida de la membrana y con cascadas posteriores de segundos mensajeros. En neuronas y glía, la actividad del nAChR α7 influye en la plasticidad sináptica, la liberación de neurotransmisores y las vías dependientes de Ca²⁺, incluidas las señales MAPK/ERK y PI3K/AKT; mientras que, en contextos inmunitarios y epiteliales, puede modular la producción de citocinas y la excitabilidad celular. La expresión o función desregulada de CHRNA7 se ha asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y del neurodesarrollo, incluidos endofenotipos relacionados con la esquizofrenia y la epilepsia, y se ha investigado en la enfermedad de Alzheimer y en biología de la inflamación. Como receptor de superficie que integra la unión del ligando con la señalización intracelular, CHRNA7 se estudia con frecuencia en modelos de diferenciación neuronal, actividad de redes y dinámica de calcio evocada por estímulos.

Las partículas de activación lentiviral Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de CHRNA7 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción CHRNA7, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 7/CHRNA7. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo CHRNA7 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.