Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
NFATc2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400422
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NFATc2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NFATc2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NFATc2 Anticuerpo (4G6-G5): sc-7296
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NFATc2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400422 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NFATC2 codifica NFATc2, un factor de transcripción regulado por calcio/calcineurina que coordina programas de expresión génica aguas abajo de la señalización del receptor de células T y de otras vías de inmunorreceptores. Tras la desfosforilación, NFATc2 se transloca al núcleo y coopera con AP-1 y otros cofactores para regular la producción de citocinas, la diferenciación inducida por activación y la tolerancia inmunitaria. La actividad de NFATc2 integra la señalización de Ca²⁺ con el crosstalk de MAPK y NF-κB, modulando la proliferación de los linfocitos y su función efectora. La desregulación de la señalización de NFATC2 se ha implicado en fenotipos inflamatorios y autoinmunes, y también se estudia por sus posibles funciones en las interacciones tumor–sistema inmune y en estados transcripcionales aberrantes en la biología del cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NFATc2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NFATC2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NFATC2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NFATC2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NFATc2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NFATC2 para la investigación de la señalización de NFATc2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NFATC2 críticos para la función de NFATc2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NFATC2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NFATc2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NFATc2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NFATC2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NFATc2 (h) y el plásmido HDR NFATc2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NFATC2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NFATC2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.