Neurogenin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401250

Übersicht

NEUROG2 (Neurogenin 2) ist ein Transkriptionsfaktor der basic-helix-loop-helix-(bHLH)-Familie, der als proneuraler Masterregulator die Festlegung auf die neuronale Zelllinie und die Differenzierung in der menschlichen Neuralentwicklung steuert. Er koordiniert Genexpressionsprogramme, die den Austritt aus dem Zellzyklus, das Neuritenauswachsen und die Reifung exzitatorischer neuronaler Identitäten kontrollieren, und ist dabei in entwicklungsbiologische Signalnetzwerke wie die Notch-vermittelte laterale Inhibition sowie umfassendere neurogene Transkriptionskaskaden eingebunden. Die Aktivität von NEUROG2 prägt die kortikale und spinale Neurogenese, indem sie Schicksalsentscheidungen von Vorläuferzellen und den zeitlichen Ablauf der Differenzierung lenkt. Fehlregulierte NEUROG2-assoziierte Programme sind relevant für Studien zur Neuroentwicklungsbiologie und zu Mechanismen, die einer veränderten neuronalen Spezifikation und Reifung zugrunde liegen.

Das Neurogenin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NEUROG2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NEUROG2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NEUROG2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Neurogenin 2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NEUROG2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Neurogenin 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NEUROG2-Exone abzielen, die für die Neurogenin 2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NEUROG2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Neurogenin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Neurogenin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NEUROG2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Neurogenin 2 HDR-Plasmid (h) und Neurogenin 2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NEUROG2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NEUROG2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.