neurexin III Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406719

Descripción general

NRXN3 codifica la neurexina III, una molécula presináptica de adhesión celular que organiza la formación y el mantenimiento de las sinapsis al unirse a socios postsinápticos como las neuroliginas y otros andamiajes sinápticos. A través de estas interacciones transinápticas, la neurexina III ayuda a regular la probabilidad de liberación de neurotransmisores, la especificación sináptica y el remodelado dependiente de la actividad que da forma al funcionamiento de los circuitos neuronales. NRXN3 participa en vías que gobiernan la exocitosis de vesículas sinápticas, la señalización dependiente de calcio y el equilibrio excitatorio/inhibitorio en redes en desarrollo y maduras. La variación genética y la expresión alterada de NRXN3 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de conectividad sináptica y disfunción a nivel de circuitos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO neurexin III (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NRXN3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NRXN3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NRXN3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína neurexin III.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NRXN3 para la investigación de la señalización de neurexin III, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NRXN3 críticos para la función de neurexin III
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NRXN3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido neurexin III CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido neurexin III CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NRXN3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR neurexin III (h) y el plásmido HDR neurexin III (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NRXN3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NRXN3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.