NCCT Productos CRISPR Knockout y Activación (m)

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Ficha técnica

- Target species: mouse; for corresponding human product, see NCCT CRISPR Plasmids (h)
- Los plásmidos consisten en NCCT una guia especifica de ARN de 20 nt, obtenida de la libreria GeCKO (v2)
- las secuencias del gRNA dirigen a la proteina Cas9 para que genere un corte de doble cadena (DSB) especificamente en el ADN del gen
- Target-specific CRISPR Plasmids for both gene knockout and activation are available. Please refer to the detailed product information in the tabs below
- Todos los productos se proporcionan listos para usar, plásmidos purificados de ADN, excepto las Partículas Lentivirales que son envasadas como Párticulas Lentivirales para usar con células dificiles de transfectar.

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CRISPR/Cas9 KO plasmids, Double Nickase Plasmids and CRISPR/dCas9 Activation plasmids are considered a "Licensed Product" and are to be used in accordance with the Limited License. Click here for details

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Información del gen

Especies	Nombre del Gen	Gen ID	Ubicación en el cromosoma	Numero de Acceso de Isoforma (ARNm)	Número de Acceso de la Proteína	Número OMIM™
Mouse	Slc12a3	20497	8 C5	XM_017312625, XM_017312626, XM_017312627, NM_001205311, NM_019415	P59158	N/A

Descripción

20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
NCCT Plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) consiste en un conjunto de tres plásmidos, cada uno expresa una nucleasa Cas9 y una NCCT- guia de RNA de 20 nt (gRNA) diseñada para aumentar la eficiencia del Knockout
Las secuencias del gRNA provienen de la biblioteca genómica GeCKO (v2) y dirigen a la proteína Cas9 para producir la rotura de la doble cadena (DSB) en el ADN genómico (%link_11%)
Para seleccionar las células que contienen un doble corte producido por Cas9, se recomienda la co-trasnfección con NCCT Plásmido HDR (m) (sc-422972-HDR)
contacte con el Servicio Técnico para conocer la disponibilidad del anticuerpo control

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
NCCT Plásmido HDR (m) está recomendado para co -transfectar con NCCT Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
NCCT Plásmido HDR (m) es un conjunto de 2-3 plásmidos, cada uno contienen una una plantilla para la Reparación del ADN por Homología Dirigida (HDR) correspondientes a los cortes generados por NCCT Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m)
Cada plantilla HDR contiene dos brazos homólogos de 800 pares de bases, diseñados para unirse específicamente al ADN genómico que rodea el corte inducido por Cas 9
Cada plásmido HDR inserta un gen de resistencia a puromicina para permitir la selección de células con knockout (KO) y RFP (Proteína Roja Fluorescente) para verificar visualmente la transfección
La resistencia a Puromicina y el gen RFP están flanqueados por dos sitios LoxP, para permitir un posterior procesamiento con el Cre Vector sc-418923

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
El Plásmido Double Nickase (m)NCCT consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
Los ARN guía codificados en el Plásmido Doble Nickase (m2 )NCCT son diferentes del par codificado en Plásmido Doble Nickase (m)

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20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
El Plásmdo de Activación CRISPR (m) NCCT es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
Los Plásmdo de Activación CRISPR (m) NCCT incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.

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200 µl de Partículas Lentivirales de Activación CRISPR/dCas listas para usar
Partículas Lentivirales de Acitvación (m) NCCT es un sistema de activación de la trascripción por mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen determinado a través de la tranducción lentiviral de las células
Partículas Lentivirales de Acitvación (m) NCCT incluyen los siguientes elementos activadores SAM: plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada, (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y un plásmido que codifica la secuencia de diana específica de 20 nt de ARN. También contienen genes de resistencia a blasticidina, higromicina y puromicina.
El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación génica
El ARN guía de las Partículas Lentivirales de Activación (m2) NCCT codifica una secuancia diana especifica de 20 nt, que es diferente del ARN guia de Partículas Lentivirales de Activación (m)

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