Na+ CP type Iβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422819
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Na+ CP type Iβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Na+ CP type Iβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Na+ CP type Iβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422819 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Scn1b codifica a subunidade β1 do canal de sódio (Na+ CP tipo Iβ), um componente auxiliar que modula a abertura/fechamento (gating) de canais de sódio dependentes de voltagem, a expressão na superfície celular e a estabilidade do complexo do canal em membranas excitáveis. Além de moldar a iniciação e a propagação do potencial de ação, a SCN1B participa de interações neurônio–glia e de processos de adesão celular que influenciam a excitabilidade da rede e a função de axônios mielinizados. Em camundongos, a atividade de Scn1b está intimamente ligada a vias que regulam a excitabilidade de membrana, a transmissão sináptica e a suscetibilidade a convulsões, e alterações na função da β1 têm sido associadas à epilepsia e a fenótipos neurodesenvolvimentais mais amplos. Essas propriedades tornam Scn1b um alvo útil para dissecar mecanismos que conectam a regulação de canais iônicos à excitabilidade em nível de circuito e a modelos de doenças neurológicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Na+ CP type Iβ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Scn1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Scn1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Scn1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Na+ CP type Iβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Scn1b para a investigação da sinalização de Na+ CP type Iβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Scn1b críticos para a função Na+ CP type Iβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Scn1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Na+ CP type Iβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Na+ CP type Iβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Scn1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Na+ CP type Iβ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Na+ CP type Iβ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Scn1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Scn1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.