NAP1L3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407403

Descripción general

NAP1L3 (proteína de ensamblaje de nucleosomas 1, similar 3) es una chaperona de histonas de la familia NAP1 implicada en el ensamblaje y desensamblaje de nucleosomas, que respalda la dinámica de la cromatina durante la replicación del ADN, la transcripción y la reparación del ADN. Al modular la deposición y el intercambio de las histonas H2A–H2B, NAP1L3 puede influir en la regulación epigenética, la estabilidad del genoma y las transiciones de estado celular vinculadas a programas de diferenciación. La remodelación alterada de la cromatina y la actividad de chaperonas de histonas se asocian con frecuencia a redes transcripcionales desreguladas observadas en el cáncer y en trastornos del desarrollo, lo que convierte a NAP1L3 en un nodo útil para estudios mecanísticos. Investigar la función de NAP1L3 puede ayudar a definir cómo las vías de ensamblaje de la cromatina se interconectan con las respuestas al estrés replicativo y el control transcripcional.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NAP1L3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NAP1L3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NAP1L3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NAP1L3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NAP1L3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NAP1L3 para la investigación de la señalización de NAP1L3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NAP1L3 críticos para la función de NAP1L3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NAP1L3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NAP1L3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NAP1L3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NAP1L3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NAP1L3 (h) y el plásmido HDR NAP1L3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NAP1L3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NAP1L3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.