Nap-22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406361

Descripción general

BASP1 (Nap-22) es una proteína asociada a la membrana y miristoilada, enriquecida en neuronas y otras células excitables, donde contribuye a la organización de la actina cortical, la dinámica de la membrana y la señalización dependiente de fosfoinosítidos. Modula programas transcripcionales mediante interacciones con factores nucleares como WT1 y participa en procesos como el crecimiento de neuritas, la función sináptica y la diferenciación celular. La actividad de BASP1 se ha vinculado a vías que gobiernan la remodelación del citoesqueleto, la transducción de señales en la membrana plasmática y el control epigenético de la expresión génica. Se han descrito alteraciones en la expresión o la regulación de BASP1 en múltiples contextos patológicos, incluidos fenotipos del neurodesarrollo y cambios asociados al cáncer en programas de proliferación e invasión.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nap-22 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BASP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BASP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BASP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nap-22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BASP1 para la investigación de la señalización de Nap-22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de BASP1 críticos para la función de Nap-22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BASP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nap-22 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nap-22 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BASP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nap-22 (h) y el plásmido HDR Nap-22 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BASP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BASP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.