Plasmide Double Nickase (h) NALP1: sc-402588-NIC

Le gène humain **NLRP1** code la protéine capteur **NALP1**, un récepteur à répétitions riches en leucine et domaine de liaison aux nucléotides (NLR) qui initie l’assemblage de l’inflammasome en réponse au stress cellulaire et à des signaux associés aux agents pathogènes. Lors de son activation, NALP1 favorise l’activation de la caspase‑1 ainsi que la maturation de l’IL‑1β et de l’IL‑18, reliant la détection innée aux signaux pyroptotiques et à la libération de cytokines inflammatoires. Cette voie recoupe l’amorçage par NF‑κB, la surveillance de la protéostasie et des points de contrôle de la mort cellulaire qui façonnent l’homéostasie épithéliale et immunitaire. Une activité dérégulée de NLRP1 a été associée à des phénotypes inflammatoires et auto-immuns, et est fréquemment étudiée dans le contexte de l’inflammation des tissus barrières et de la signalisation de l’immunité innée induite par le stress.

NALP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NLRP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NLRP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NLRP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NLRP1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.