N6AMT2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406341

Descripción general

EEF1AKMT1 codifica N6AMT2, una metiltransferasa de lisina que modifica factores asociados a la traducción y contribuye a la proteostasis al ajustar la síntesis proteica y el control de calidad cotraduccional. N6AMT2 se ha relacionado con la regulación de la función del ribosoma y con aspectos más amplios del metabolismo del ARN, conectándola con programas de crecimiento celular y con el control traduccional adaptativo frente al estrés. La metilación alterada de la maquinaria de traducción puede reconfigurar las salidas de señalización aguas abajo de la detección de nutrientes y del estrés proteotóxico, lo que hace que EEF1AKMT1 sea relevante para estudios sobre progresión del ciclo celular, apoptosis y adaptación metabólica. La desregulación de la traducción y del control dependiente de metiltransferasas se observa con frecuencia en contextos de investigación en cáncer y neurobiología, lo que respalda la investigación de N6AMT2 en fenotipos asociados a enfermedad sin implicar utilidad clínica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO N6AMT2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen EEF1AKMT1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del EEF1AKMT1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de EEF1AKMT1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína N6AMT2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en EEF1AKMT1 para la investigación de la señalización de N6AMT2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de EEF1AKMT1 críticos para la función de N6AMT2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de EEF1AKMT1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido N6AMT2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus EEF1AKMT1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR N6AMT2 (h) y el plásmido HDR N6AMT2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología EEF1AKMT1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana EEF1AKMT1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.