Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) N-CoR: sc-422771-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)N-CoR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa N-CoR (m) y el plásmido de doble nickasa N-CoR (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ncor1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: N-CoR Anticuerpo (F-1): sc-515934
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) N-CoR | sc-422771-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Ncor1 de ratón codifica el correpresor 1 de receptores nucleares (N-CoR), una proteína andamiaje que ensambla complejos de represión transcripcional con HDAC3 y otros cofactores para regular la accesibilidad de la cromatina y los programas de expresión génica. N-CoR modula la señalización aguas abajo de receptores nucleares y de factores de transcripción definidores de linaje, influyendo en decisiones de destino celular, la homeostasis metabólica y redes génicas inmunes e inflamatorias. Mediante el control epigenético de la actividad de potenciadores y promotores, N-CoR contribuye a la regulación coordinada de la diferenciación, las respuestas circadianas y hormonales, y estados transcripcionales adaptativos al estrés. La desregulación de la función de Ncor1/N-CoR se ha implicado en vías relevantes para el neurodesarrollo, el metabolismo y fenotipos asociados al sistema inmunitario, lo que lo convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos en modelos murinos.
N-CoR El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ncor1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ncor1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ncor1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ncor1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.