Myozenin 3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406184

Descripción general

MYOZ3 codifica la miozenina 3, una proteína asociada al disco Z que contribuye a la organización sarcomérica al enlazar componentes estructurales con complejos de señalización en el músculo estriado. Los miembros de la familia de las miozeninas interactúan con la α-actinina y con moduladores de la señalización calcineurina–NFAT, lo que implica a MYOZ3 en vías que acoplan la carga mecánica con la remodelación transcripcional y el mantenimiento de las fibras musculares. La desregulación de la arquitectura del disco Z y de la señalización dependiente de calcineurina es relevante para estudios sobre la integridad miofibrilar, la contractilidad y las respuestas adaptativas al estrés en músculo esquelético y cardíaco. Por tanto, MYOZ3 constituye una diana útil para analizar la interacción entre el citoesqueleto y la transducción de señales en biología muscular y en sistemas modelo de enfermedades relacionadas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Myozenin 3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYOZ3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYOZ3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYOZ3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Myozenin 3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYOZ3 para la investigación de la señalización de Myozenin 3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYOZ3 críticos para la función de Myozenin 3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYOZ3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYOZ3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Myozenin 3 (h) y el plásmido HDR Myozenin 3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYOZ3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYOZ3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.