Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
myogenin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400176
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- myogenin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico myogenin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: myogenin Anticuerpo (5FD): sc-52903
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
myogenin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400176 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MYOG codifica la miogenina, un factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básica que impulsa la diferenciación terminal del músculo esquelético al coordinar la salida del ciclo celular de los mioblastos y la activación de programas génicos estructurales musculares. La miogenina actúa dentro de la red central de factores reguladores miogénicos junto con MYOD1 y MYF5, e integra señales del desarrollo procedentes de vías como WNT, NOTCH y TGF-β/SMAD para moldear el compromiso de linaje y la maduración. Se une a motivos E-box para regular programas transcripcionales vinculados a la formación de miofibrillas, la remodelación metabólica y el desarrollo neuromuscular. La expresión desregulada de MYOG y la circuitería transcripcional miogénica se utilizan como lecturas moleculares en estudios sobre pérdida de masa muscular, regeneración deficiente y mecanismos de enfermedades neuromusculares.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO myogenin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYOG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYOG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYOG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína myogenin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYOG para la investigación de la señalización de myogenin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MYOG críticos para la función de myogenin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYOG para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido myogenin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido myogenin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYOG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR myogenin (h) y el plásmido HDR myogenin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYOG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYOG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.