Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MYH9 Double Nickase Plasmid (h): sc-401182-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MYH9 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MYH9 Double-Nickase-Plasmid (h) und MYH9 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MYH9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MYH9 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401182-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYH9 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401182-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MYH9 kodiert das nicht-muskelständige Myosin IIA, ein aktinabhängiges Motorprotein, das kontraktile Kräfte erzeugt und die Organisation des Zytoskeletts unterstützt. Es trägt zu Prozessen wie Zelladhäsion, Migration, Mechanotransduktion, Zytokinese sowie zur Aufrechterhaltung der Morphologie von Epithelzellen und Thrombozyten bei, indem es die Aktomyosin-Dynamik reguliert. Die MYH9-Aktivität ist mit Rho-GTPase/ROCK-Signalwegen und Fokaladhäsions-Pathways verknüpft, die die Bildung von Stressfasern und die kortikale Spannung koordinieren. Eine Fehlregulation oder Mutation von MYH9 ist mit erblichen MYH9-assoziierten Erkrankungen verbunden, die durch Makrothrombozytopenie und variable extra-hämatologische Merkmale gekennzeichnet sind, weshalb MYH9 häufig als Ziel zur Untersuchung zytoskelettaler Krankheitsmechanismen genutzt wird.
MYH9 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MYH9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MYH9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MYH9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MYH9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.