MYH10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401835

Descripción general

MYH10 codifica la miosina IIB no muscular, una proteína motora basada en actina que genera fuerza contráctil y favorece la remodelación del citoesqueleto en células humanas. Participa en la organización de la red de actomiosina, la migración celular, la adhesión, la citocinesis y el mantenimiento de la polaridad celular mediante la regulación de las fibras de estrés y de la dinámica del anillo contráctil. La función de MYH10 se cruza con vías que controlan la morfogénesis y la mecanotransducción, vinculando la actividad motora con cambios en la forma celular y la arquitectura tisular. La alteración de la expresión o la actividad de MYH10 se ha asociado con defectos en el desarrollo y en la división celular, y se estudia con frecuencia en el contexto de la desregulación de la dinámica del citoesqueleto en modelos de cáncer y de enfermedades del neurodesarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MYH10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MYH10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MYH10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MYH10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MYH10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MYH10 para la investigación de la señalización de MYH10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MYH10 críticos para la función de MYH10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MYH10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MYH10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MYH10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MYH10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MYH10 (h) y el plásmido HDR MYH10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MYH10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MYH10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.