Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MYG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405754
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MYG1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MYG1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MYG1 Anticuerpo (F-5): sc-393331
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MYG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405754 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
C12orf10 codifica MYG1, una nucleasa conservada implicada en el metabolismo del ARN y el mantenimiento del genoma, con actividad descrita frente a sustratos de ARN y funciones en el procesamiento de ARN mitocondrial y nuclear. MYG1 se ha relacionado con la regulación de la expresión génica mitocondrial y la homeostasis energética celular, conectándola con vías que coordinan el recambio de ARN, la fosforilación oxidativa y programas transcripcionales adaptativos al estrés. La alteración de la función de MYG1 puede perturbar el control de calidad del ARN y la función de los orgánulos, procesos que con frecuencia se asocian a proliferación alterada, desequilibrio de la proteostasis y señalización inflamatoria en contextos relevantes para la enfermedad. Estas características hacen de MYG1 una diana útil para estudios mecanísticos de redes de procesamiento de ARN y de la comunicación mitocondria–núcleo en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MYG1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen C12orf10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del C12orf10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de C12orf10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MYG1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en C12orf10 para la investigación de la señalización de MYG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de C12orf10 críticos para la función de MYG1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de C12orf10 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MYG1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MYG1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus C12orf10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MYG1 (h) y el plásmido HDR MYG1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología C12orf10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana C12orf10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.