Plásmido Doble Nickase (m) Myc: sc-421770-NIC

Myc (c-Myc) es un factor de transcripción básico de tipo hélice‑bucle‑hélice con cremallera de leucina que heterodimeriza con MAX para regular amplios programas de expresión génica que controlan el crecimiento celular, la biogénesis ribosomal, el metabolismo y la progresión del ciclo celular. Integra señales de vías mitogénicas, entre ellas Wnt/β‑catenina, MAPK/ERK, PI3K–AKT–mTOR y TGF‑β, coordinando salidas transcripcionales que influyen en la proliferación y la diferenciación. En modelos murinos, la actividad desregulada de Myc altera la estabilidad genómica, la apoptosis y los estados de reprogramación celular, lo que lo convierte en un nodo central para estudiar la señalización oncogénica y el control transcripcional. Las redes dependientes de Myc se utilizan ampliamente para investigar vulnerabilidades específicas del contexto en células transformadas frente a células normales y para cartografiar circuitos reguladores de genes en el desarrollo y en la biología de la enfermedad.

Myc El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Myc en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Myc. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Myc. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Myc alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.