Mx1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421763

Descripción general

Mx1 (resistencia a mixovirus 1) codifica una GTPasa estimulada por interferón, similar a la dinamina, que funciona como un efector clave de la respuesta antiviral innata en células de ratón. Tras la señalización de interferones de tipo I y tipo III a través de la vía JAK–STAT, Mx1 se induce transcripcionalmente y puede restringir la replicación de una variedad de virus de ARN al interferir con el tráfico de la nucleocápside viral y la formación del complejo de replicación. La actividad de Mx1 se integra con redes más amplias de genes estimulados por interferón (ISG) que modulan la señalización inflamatoria, la presentación de antígenos y la inmunidad intrínseca celular. La variación en la restricción dependiente de Mx1 se ha aprovechado para estudiar la susceptibilidad del hospedador a la infección viral, la inmunopatología impulsada por interferón y los mecanismos de evasión inmunitaria.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mx1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mx1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mx1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mx1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mx1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mx1 para la investigación de la señalización de Mx1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mx1 críticos para la función de Mx1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mx1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mx1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Mx1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mx1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mx1 (m) y el plásmido HDR Mx1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mx1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mx1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.