Mx1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400977

Descripción general

MX1 codifica la proteína de resistencia a los mixovirus 1 (Mx1), una GTPasa tipo dinamina estimulada por interferón que media la defensa antiviral intrínseca al restringir la replicación de diversos virus de ARN. Mx1 se induce aguas abajo de la señalización de interferón de tipo I y tipo III a través de la vía JAK–STAT y se integra en programas más amplios de inmunidad innata gobernados por la transcripción impulsada por ISGF3. Al modular el tráfico de la nucleocápside viral y la integridad de los complejos de replicación, Mx1 contribuye a respuestas de estrés celular que determinan la producción de citocinas y la resistencia intrínseca de las células inmunitarias. La expresión desregulada de MX1 se utiliza ampliamente como una lectura molecular de la activación de la vía del interferón y es relevante para estudios de susceptibilidad viral, estados inflamatorios crónicos y microambientes tumorales caracterizados por firmas elevadas de interferón.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Mx1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MX1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MX1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MX1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Mx1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MX1 para la investigación de la señalización de Mx1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MX1 críticos para la función de Mx1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MX1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Mx1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Mx1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MX1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Mx1 (h) y el plásmido HDR Mx1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MX1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MX1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.