Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Muskelin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409182
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Muskelin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Muskelin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Muskelin Anticuerpo (C-12): sc-398956
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Muskelin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409182 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MKLN1 codifica muskelina, una proteína andamiaje citosólica y asociada a vesículas implicada en el tráfico intracelular, la organización del citoesqueleto y la proteostasis. La muskelina participa en el transporte endosomal y en procesos relacionados con la adhesión celular, y se ha vinculado con la regulación del recambio de receptores y canales iónicos mediante la coordinación de complejos multiproteicos. Al influir en la dinámica dependiente de microtúbulos y en la localización subcelular de componentes de señalización, MKLN1 puede modular vías que gobiernan la morfología celular, la migración y las respuestas al estrés. La alteración de la función de MKLN1/muskelina se ha estudiado en el contexto de la neurobiología y de fenotipos asociados al cáncer, lo que respalda su relevancia para investigaciones mecanísticas sobre la señalización dependiente del tráfico y la homeostasis celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Muskelin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MKLN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MKLN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MKLN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Muskelin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MKLN1 para la investigación de la señalización de Muskelin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MKLN1 críticos para la función de Muskelin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MKLN1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Muskelin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Muskelin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MKLN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Muskelin (h) y el plásmido HDR Muskelin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MKLN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MKLN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.